dünaamiline BIOSENSORS heliXcyto normaliseerimislahenduse kasutusjuhend

dünaamiline BIOSENSORS heliXcyto normaliseerimislahus

Sisu peita

7 Dokumendid / Ressursid

7.1 Viited

8 Seotud postitused

Põhifunktsioonid

Helix cyto kiibi punktide 1 ja punkti 2 fluorestsentssignaalide normaliseerimiseks

Võimaldab punaste või roheliste fluorestsentssignaalide õiget reaalajas viitamist RT-IC mõõtmiste ajal
Ühildub kõigi heliX cyto kiipidega
Normaliseerimislahus-Ra kannab mõõdukalt hüdrofiilset punast värvainet, millel on üks positiivne netolaeng

Normaliseerimislahus-Ga kannab hüdrofiilset rohelist värvainet, millel on üks negatiivne netolaeng

Toote kirjeldus

Tellimuse number: NOR-0

Tabel 1. Sisu ja salvestusteave

Materjal	Kork	Keskendumine	Summa	Säilitamine
Normaliseerimislahus-Ra	Oranž	10 uM	3x 100 µL	-20 °C
Normaliseerimislahus-Ga	Roheline	10 uM	3x 100 µL	-20 °C

Ainult teaduslikuks kasutamiseks.

Sellel tootel on piiratud kõlblikkusaeg, palun vaadake kõlblikkusaega etiketil.

Ettevalmistus

Valige normaliseerimislahuse värv (Ga või Ra), mis vastab teie analüüdi märgistuse värvile. 10 µM normaliseerimispõhilahus lahjendada jooksva puhvriga töökontsentratsioonini.

Eksperimendi jaoks vajaliku lõpliku mahu leiate heliOS-istample salv view analüüsist.

Normaliseerimislahuse kontsentratsioon peaks ligikaudu vastama fluorofoori kontsentratsioonile kõrgeimas mõõdetavas analüüdi kontsentratsioonis. Seda saab arvutada järgmise võrrandi abil:

: Normaliseerimislahuse kontsentratsioon soovitud värvitoonis
: Värvaine kontsentratsioon märgistatud analüüdi lahuses
: Suurim analüüdi kontsentratsioon, mida tuleks mõõta
: märgistuse aste (värvi ja analüüdi suhe)

Lahjendatud lahuseid võib hoida temperatuuril 2–8°C kuni 7 päeva.

TÄHTIS: Ärge segage normaliseerimislahust-Ra ja normaliseerimislahust-Ga koos, välja arvatud juhul, kui seadistate kahevärvilist mõõtmist (rohelise ja punase kanali paralleelne näit).

Rakendusmärkus

RT-IC mõõtmisel peaks normaliseerimislahuse fluorestsentssignaal olema a sarnane vahemik kui kõrgeim signaal, mis pärineb seotud analüüdist (toorandmed).

Absoluutne fluorestsentssignaal sõltub normaliseerimislahuse kontsentratsioonist ja mõõtmisel rakendatud ergastusvõimsusest. Ergastusvõimsus tuleb valida järgmise parameetri alusel:

a. Fluorofoori kontsentratsioon analüüdi lahuses:
Fluorofoori kontsentratsioon sõltub nii mõõtmisel kasutatud analüüdi kontsentratsioonist kui ka analüüdi märgistuse astmest. Kõrge DOL-i ja kõrge analüüdi kontsentratsiooni korral võib olla vajalik ergastusvõimsuse vähendamine.

b. Eeldatav sidumissignaal:
Tugevalt ekspresseeritud sihtmärgid rakul võivad siduda rohkem märgistatud analüüdi molekule. Väga üleekspresseeritud sihtmärkide korral võib oodata tugevat sidumissignaali. Katiku sulgumise vältimiseks võiks kaaluda ergutusvõimsuse vähendamist.

c. Kiibi tüüp:
Erinevatel kiipide tüüpidel on erinev fluorestseeruv taust. Mida suuremad on lõksud ja mida rohkem lõkse kiibil, seda kõrgem on taustasignaal. Seetõttu võivad L5 kiibid vajada väiksemat ergastusvõimsust kui M5 kiibid.

Ergastusvõimsuse ja normi lähtepunktiks. RT-IC katses kasutatava lahuse kontsentratsioon, vt tabel 2.

Tabel 2. HelX cyto M5 kiibile sobiva fluorofoori kontsentratsiooni, normaliseerimislahuse kontsentratsiooni ja ergastusvõimsuse seos

Analüüdi värvaine konts. = analüüdi kontsentratsioon x DOL	Ergastusjõud	Kontsentratsiooni normaliseerimislahus	Lahjendus Normaliseerimislahus
25 nM	0.5	25 nM	1:400
50 nM	0.3	50 nM	1:200
100 nM	0.2	100 nM	1:100
300 nM	0.1	300 nM	1:33
500 nM	0.08	500 nM	1:20
1 uM	0.05	1 uM	1:10
2.5 uM	0.02	2.5 uM	1:4

Märkus. See tabel on teile juhiseks. HelX tsütos registreeritud lõplik signaal sõltub aga paljudest teguritest. Seega on iga süsteemi jaoks vaja mõningast optimeerimist.

Võtke ühendust

Dynamic Biosensors GmbH	Dynamic Biosensors, Inc.
Perchtinger Str. 8/10	300 kaubanduskeskus, sviit 1400
81379 München	Woburn, MA 01801
Saksamaa	USA

Tellimuse teave order@dynamic-biosensors.com
Tehniline tugi support@dynamic-biosensors.com

KLIENDITUGI

www.dynamic-biosensors.com
Instrumendid ja kiibid on projekteeritud ja toodetud Saksamaal.
©2024 Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. Kõik õigused kaitstud.